Thông tin luận án đưa lên mạng, Mã số: 60 42 30 15

Cập nhật lần cuối: Thứ hai, 05 Tháng 4 2010 16:27 | Được đăng: Thứ hai, 05 Tháng 4 2010 16:21 | In bài này | Lượt xem: 4342

Tên đề tài: Nghiên cứu tạo streptokinase tái tổ hợp

Chuyên ngành: Hóa sinh học

Nghiên cứu sinh: Vũ Hồng Diệp

Cán bộ hướng dẫn: PGS. TS Nguyễn Thị Ngọc Dao, PGS. TS. Quyền Đình Thi.

Cơ sở đào tạo: Viện Công nghệ sinh học, Viện Khoa học và Công nghệ Việt Nam

TÓM TẮT NHỮNG KẾT LUẬN MỚI CỦA LUẬN ÁN

1. Đã phân lập được chủng Streptococcus pyogenes DT7 của Việt Nam mang gene mã hóa streptokinase (GenBank: GQ247718);

2. Nhân dòng, phân tích trình tự gene mã hóa streptokinase từ Streptococcus pyogenes DT7 (GenBank: EU872448) cho thấy độ tương đồng cao (99,6%) so với gene mã hóa streptokinase từ S. pyogenes MGAS10750 (GenBank: CP000262);

3. Tạo được chủng E. coli và P. pastoris tái tổ hợp có khả năng sinh tổng hợp streptokinase với năng suất tương ứng 7591 U/mL và 2374 U/mL dịch nuôi cấy; Đã khảo sát được các điều kiện nuôi cấy cho các chủng này là:

    • E. coli tái tổ hợp: 10 giờ nuôi cấy, nhiệt độ 25°C, pH 7,0 và nồng độ chất cảm ứng 0,5 mM IPTG;

    • P. pastoris tái tổ hợp: 30 giờ nuôi cấy, nhiệt độ 28°C, pH 5,5 và nồng độ chất cảm ứng 1,25% methanol.

4. Đã tinh sạch và nhận diện protein tái tổ hợp là streptokinase; streptokinase tái tổ hợp có hoạt tính hoạt hóa plasminogen; đã nghiên cứu ảnh hưởng của 4 yếu tố nhiệt độ, pH, dung môi và chất tẩy rửa tới hoạt độ và độ bền của streptokinase tái tổ hợp: bền ở nhiệt độ thấp (4°C); pH tối ưu 7,0; isopropanol có ảnh hưởng tăng nhẹ hoạt độ SK ở nồng độ thấp (10%); không thích hợp trong môi trường có các ion kim loại Ag+, Ca2+, Co2+, Cu2+, Fe2+, K+, Mn2+, Ni2+, Zn2+ và EDTA; các chất tẩy rửa Triton X-100, Tween 80 và Tween 20 có tác dụng hoạt hóa SK mạnh; sau khi hoạt hoá, streptokinase tái tổ hợp có hoạt độ riêng tăng gấp hơn 2 lần và bền hơn streptokinase từ hãng Sigma.

Tin mới hơn

Tin cũ hơn